Комплексное генетическое исследование «Фолатный цикл»

Подготовка: : Кровь сдавать строго утром натощак. Накануне исследования (в течение 24 часов) обязательно исключить алкоголь, интенсивные физические нагрузки, прием лекарственных препаратов (по согласованию с врачом). За 1-2 часа до сдачи крови воздержаться от курения, не употреблять сок, чай, кофе, можно пить негазированную воду. При не соблюдении данных правил, результаты теста всегда будут не корректны и их интерпретация не возможна.

Исследуемый материал: Цельная кровь с  ЭДТА.

Фолатный цикл — каскад сложных биохимических реакций, которые проходят только в присутствии производных фолиевой кислоты и витаминов группы В. Их дефицит, связанный с особенностями диеты, а также мутации в генах фолатного обмена, обусловливающие снижение активности ферментов, приводят к избыточному накоплению гомоцистеина  в крови и, как следствие, нарушению процессов метилирования в клетках.

Это приводит к развитию ряда патологических состояний, таких как: атеросклерозы дефект незаращения невральной трубки атеротромбозы инфаркты нарушение расхождения хромосом в оогенезе (повышает риск рождения детей с синдромом Дауна). Анализ мутаций в генах фолатного цикла - метилентетрагидрофолатредуктазы (MTHFR), редуктазы (MTRR) и метионин синтазы (MTR) позволяет определить предрасположенность к фетоплацентарной недостаточности, незаращению нервной трубки, нерасхождению хромосом в мейозе и другим патологиям плода, несовместимым с жизнью.

Эти мутации связаны со снижением уровня фолатного статуса и развитием витамин-дефицитного состояния. Во время беременности у женщин с мутациями в этих генах отмечается снижение концентрации фолатов не только внутри эритроцитов, но и в плазме крови. Ген MTHFR расположен на хромосоме 1p36.3 и содержит 11 экзонов. Ген MTHFR кодирует аминокислотную последовательность фермента метилентетрагидрофолатредуктаза (МТГФР), играющего ключевую роль в метаболизме фолиевой кислоты. Два полиморфизма гена MTHFR встречаются в популяции с большой частотой: C677T и A1298C. Они термолабильны и способствуют накоплению гомоцистеина и снижению концентрации фолиевой кислоты. Кроме того, в результате снижения активности ферментов и гипометилирования хромосом увеличивается риск нерасхождения хромосом. Низкое потребление фолиевой кислоты влияет на людей с генотипом 677TT в большей степени, чем на тех, у которых генотип 677CC/CT. Женщины с генотипом 677TT (но не 677CC/CT) имеют более низкие плазменные уровни фолиевой кислоты и находятся в группе риска в отношении повышенных уровней гомоцистеина в плазме. Сочетание мутантного аллеля A1298C с аллелем 677T приводит к снижению уровня фолиевой кислоты. При этом риск развития дефектов невральной трубки и синдрома Дауна повышается в 2 раза. Жизнеспособность плодов, имеющих одновременно обе мутации, также снижена. Т.о., женщины с данными полиморфизмами генетически предрасположены к нерасхождению 21 хромосомы при мейозе и дефектам развития невральной трубки из-за неправильного метаболизма фолатов. Ген MTR кодирует аминокислотную последовательность фермента метионин-синтаза (МС) - одного из ключевых ферментов обмена метионина, катализирующего образование метионина из гомоцистеина путем его реметиляции. В качестве кофактора в этой реакции принимает участие витамин В12 (кобаламин). Полиморфизм гена MTR связан с аминокислотной заменой (аспарагиновой кислоты на глицин) в молекуле фермента МС. В результате этой замены функциональная активность фермента изменяется, что приводит к повышению риска развития синдрома Дауна у плода. Влияние полиморфизма усугубляется повышенным уровнем гомоцистеина. Ген MTRR кодирует аминокислотную последовательность фермента метионин-синтаза редуктаза (МСР), играющего важную роль в синтезе белка и участвующего в большом количестве биохимических реакций, связанных с переносом метильной группы. Одной из функций МСР является обратное превращение гомоцистеина в метионин. Полиморфизм гена MTRR связан с аминокислотной заменой в молекуле фермента МСР. В результате этой замены функциональная активность фермента снижается, что приводит к повышению риска нарушений развития плода - дефектов невральной трубки. Влияние полиморфизма усугубляется дефицитом витамина В12. При сочетании полиморфизма гена MTRR с полиморфизмом в гене MTHFR риск spina bifida увеличивается. Ген MTHFD1 является материнским генетическим фактором риска преждевременной отслойки нормально имплантированной плаценты.

Показания:

• Выявление гипергомоцистинемии у консультирующегося.
• Рождение ребёнка с изолированными пороками нервной трубки, сердца или урогенитального тракта.
• Рождение ребёнка с хромосомными синдромами (при нормальном кариотипе родителей).
• Наличие у консультирующегося ИБС, артериальной гипертонии.
• Невынашивание и другие осложнения, связанные с беременностью.
• Плановая подготовка к беременности и периконцепционная профилактика (режим диеты, отказ от вредных привычек, приём фолиевой кислоты, йода).

Варианты заключений:

• C/C (А/А) - полиморфизм, предрасполагающий к нарушению фолатного цикла, не обнаружен;
• T/T (G/G)- обнаружен полиморфизм, предрасполагающий к нарушению фолатного цикла, в гомозиготной форме;
• C/T (A/G) обнаружен полиморфизм, предрасполагающий к нарушению фолатного цикла, в гетерозиготной форме

Результат выдается в виде бланка:

Срок исполнения: (указанный срок не включает день взятия биоматериала) 5 рабочих дней.

Метод определения: ПЦР - рестрикционный анализ.

Интерпретация результатов исследования содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.

Литература:

1. Gueant-Rodriguez R.M., Rendeli C., Namour B. e.a. Transcobalamin and methionine synthase reductase mutated polymorphisms aggravate the risk of neural tube defects in humans // Neurosci Lett.- 2003.- 344, N 3.- P. 189-192.
2. Kirke P.N., Mills J.L., Molloy A.M. e.a. Impact of the MTHFR C677T polymorphism on risk of neural tube defects: case-control study // BMJ.- 2004.- V. 328, N 7455.- P. 1535-1536.
3. Kluijtmans L.A., van den Heuvel L.P., Boers G.H. Molecular genetic analysis in mild hyperhomocysteinemia: a common mutation in the methylenetetrahydrofolate reductase gene is a genetic risk factor for cardiovascular disease // Am J Hum Genet.- 1996.- V. 58, N 1.- P. 35-41.
4. Giovannucci E., Chen J., Smith-Warner S.A. e.a. Methylenetetrahydrofolate reductase, alcohol dehydrogenase, diet, and risk of colorectal adenomas // Cancer Epidemiol Biomarkers Prev.- 2003,- V. 12 N.10.- P. 970-979.

Toffoli G., Russo A., Innocenti F. Effect of methylenetetrahydrofolate reductase 677C->T polymorphism on toxicity and homocysteine plasma level after chronic methotrexate treatment of ovarian cancer patients // Int J Cancer.- 2003.- V. 103, N3.- P. 294-199.