VKORC1 (исследование полиморфизма гена плазменного белка - витамин К эпоксид-редуктазный комплекс 1)

Подготовка: Кровь сдавать строго утром натощак. Накануне исследования (в течение 24 часов) обязательно исключить алкоголь, интенсивные физические нагрузки, прием лекарственных препаратов (по согласованию с врачом). За 1-2 часа до сдачи крови воздержаться от курения, не употреблять сок, чай, кофе, можно пить негазированную воду. При не соблюдении данных правил, результаты теста всегда будут не корректны и их интерпретация не возможна.

Исследуемый материал: Цельная кровь с ЭДТА.

Пробирка для забора материала

Для предупреждения и лечения тромбоэмболических осложнений наиболее часто применяется препарат варфарин («Кумадин»). Он назначается для продолжительного приема в серии случаев, связанных с повышенной свертываемостью крови, а также в послеоперационный период с целью предотвратить образование тромбов вследствие хирургического вмешательства. Часто практикуется назначение препарата людям, перенесшим инсульты, инфаркт миокарда.

Ген VKORC1 кодирует субъединицу 1 витамин К – эпоксид-редуктазного комплекса (vitamin К epoxide reductase complex, subunit 1) – трансмембранного белка, основного фермента, активирующего витамин К.

Витамин К поступает в организм человека в неактивной форме, с помощью данного белка, происходит его активация, которая необходима для модификации белков свертывающей и противосвертывающей системы крови. Дефицит активированного витамина К может приводить к кровотечениям, особенно на фоне приема варфарина, который ингибирует фермент VKORC, связываясь с ним и блокируя его работу.

Одной из причин дефицита в организме активированного витамина К и замедления процесса свертывания крови является изменение в гене VKORC1, приводящее к снижению синтеза фермента.

Участок в регуляторной области гена VKORC1 (интрон 2), в котором происходит замена нуклеотида тимина (Т) в позиции 7481 на цитозин (С), обозначается как генетический маркер T7481C (альтернативное название rs2359612 A > G) и приводит к снижению функции фермента, являющегося фармацевтической «мишенью» препаратов группы кумаринов. Поэтому при лечении пациентов варфарином (производное кумарина) важно оценивать влияние полиморфизма гена VKORC1 для расчета адекватной дозы препарата. Так, в исследованиях Arnold ML et al было показано, что достижение терапевтического эффекта варфарина у пациентов с генотипом T/T наблюдалось через 3,2 дня, у пациентов с генотипом Т/С – через 4,4 дня, а у пациентов с генотипом С/С – через 6,5 дней. Таком образом, можно сделать вывод, что аллель Т ассоциирован с возможностью применения меньшей дозы варфарина по сравнению с аллелем C.

В сочетании с оценкой активности гена VKORC1 для расчета адекватной дозы лекарственных препаратов необходим также анализ генов CYP. Так как для достижения эффекта лекарственных препаратов в организме необходима их биоактивация (трансформация в активную форму) системой ферментов цитохрома Р450 (CYP), важно исследовать полиморфизм гена CYP2C9. В европейской популяции часто встречаются аллели этого гена, кодирующие образование ферментов со сниженной или отсутствующей функцией, что является причиной осложнений на фоне приема антикоагуляционных препаратов.

Показания:

• Плановое назначение препарата варфарина.
• Длительный приём варфарина.
• Неустойчивость значений МНО у консультирующегося.
• Стандартная дозировка варфарина не даёт клинического эффекта.
• Кровотечения, связанные с приёмом варфарина, в анамнезе у консультирующегося или родственников I и II степени родства.

Варианты заключений:

• Генотип А/А - аллели, затрудняющие действие варфарина и его аналогов, не обнаружены;
• Генотип А/В - обнаружены аллели, затрудняющие действие варфарина и его аналогов, в гетерозиготной форме. Требуется индивидуальный подбор дозировки вышеуказанных препаратов (возможно увеличение дозы препарата для повышения его эффективности);
• Генотип В/В - обнаружены аллели, затрудняющие действие варфарина и его аналогов, в гомозиготной форме. Требуется индивидуальный подбор дозировки вышеуказанных препаратов (возможно увеличение дозы препарата для повышения его эффективности).

Результат выдается в виде бланка:

Срок исполнения: (указанный срок не включает день взятия биоматериала) 5 рабочих дня.

Метод определения: ПЦР - рестрикционный анализ.

Литература:

1. Rieder M., Reiner A., Gage B. e.a. Effect of VKORC1 Haplotypes on Transcriptional Regulation and Warfarin Dose // The New England Journal of Medicine.- - V. 352.- P. 2285-2293.